Universität zu Köln

In Metazoen stellt der Exon-Verbindungs Komplex (`exon junction complex´, EJC) eine zentrale Komponente von gespleißten Ribonukleoproteinpartikeln (mRNPs) dar. EJCs werden mithilfe von Spleißosomen im Zellkern zusammengesetzt und nahe Exon-Exon Grenzen auf der mRNA platziert. Der heterotetramere Kern des EJC besteht aus den Proteinen eIF4A3 (DDX48), MAGOH, RBM8 (Y14) und CASC3/MLN51/Barentz (BTZ). EJCs sind in verschiedenste Schritte der posttranskriptionalen Genexpression involviert, unter anderem das Spleißen, die Translation und den nonsense-vermittelten mRNA-Abbau (NMD). BTZ ist eine wichtige funktionale Komponente innerhalb dieser Prozesse und an der Stimulation von sowohl Translation als auch NMD beteiligt. In dieser Arbeit wird gezeigt, dass die N-terminale sowie die SELOR (`Speckle Localizer and RNA-binding´) Domäne von BTZ, NMD im Rahmen eines Tethering-Assays induzieren können und dabei zwei verschiedene Wege der NMD-Aktivierung genutzt werden. Darüber hinaus wird dargestellt, dass die C-terminale Domäne eine nicht-kanonische Polyadenylierungsstelle innerhalb der 3ʹ UTR einer Reporter-mRNA aktiviert, was darauf hinweist, dass BTZ an alternativer Polyadenylierung beteiligt ist. Zudem wird präsentiert, dass die SELOR Domäne in virto präferenziell bestimmte mRNAs bindet und in vivo die mRNA- Interaktion von SELOR EJC-abhängig ist. die Zusätzlich konnten verschieden SR-Proteine in SELOR-assoziierten Proteinkomplexen identifiziert werden, wobei für einige dieser SR Proteine eine NMD-aktivierende Funktion nachgewiesen werden konnte. Diese Ergebnisse zeigen eine neue, EJC-abhängige sowie –unabhängige, regulatorische Funktion von BTZ innerhalb der posttranskriptionalen Geneexpression.

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