Universität zu Köln

Alm, Patricia Stefanie ORCID: 0009-0001-0287-8090 (2026). Die Aktivierung von PKA-II durch TRP-Kanal-Agonisten ist unabhängig vom cyclischen Adenosinmonophosphat in nozizeptiven Neuronen. PhD thesis, Universität zu Köln.

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Abstract

Die Öffnung des spannungsabhängigen Calciumkanals Cav1.2 nach Depolarisation aktiviert Typ-II Protein Kinase A (PKA-II) in nozizeptiven Neuronen in vitro und bewirkt langanhaltende mechanische Hyperalgesie in vivo. Im Gegensatz zur Aktivierung von PKA-II durch G Protein-gekoppelte Rezeptoren, ist die Aktivierung von PKA-II nach Depolarisation unabhängig von cAMP und wird nicht durch Opioide inhibiert. Die vorliegenden Arbeit sollte untersuchen, ob dieser pronozizeptive Mechanismus auch durch Aktivierung der ligandengesteuerten Kationenkanäle TRPA1 und TRPV1 aktiviert wird. Übernachtkulturen dissoziierter sensorischer Neurone der Ratte wurden in einer 2 Stunden-Kinetik mit dem TRPV1-Agonisten Capsaicin, dem TRPA1-Agonisten AITC oder dem 5HT4-Agonisten Serotonin stimuliert, fixiert und immunzytochemisch gefärbt. Als Korrelat für die Aktivität der PKA-II wurde die Fluoreszenzintensität eines phospho-spezifischen Antikörpers gegen die regulatorischen Untereinheiten von PKA-II mittels High-Content-Imaging quantifiziert. Zur mechanistischen Analyse der cAMP-Abhängigkeit erfolgte die Prästimulation mit dem Phosphodiesterase-Inhibitor IBMX, dem inaktiven cAMP-Analogon Rp-cAMPS-pAB oder dem Adenylylcylasehemmenden Opioid Fentanyl. Serotonin fungierte bei cAMP-abhängiger PKA-Aktivierung als Positivkontrolle. Die Prästimulation mit IBMX führte ubiquitär zu einem Anstieg der basalen PKA-II Aktivität und verlängerte in der Stimulation mit Serotonin die PKA-II Aktivität zusätzlich. Eine Verlängerung der PKA-II Aktivität bei Stimulationen mit AITC und mit Capsaicin blieb aus. Die Prästimulation mit Rp-cAMPS-pAB inhibierte die PKA-II nach Stimulation mit Serotonin, nicht aber nach Stimulation mit Capsaicin oder AITC. Prästimulation mit dem Opioid Fentanyl reduzierte die Serotonin-induzierten PKA-II Aktivität, nicht jedoch die AITC- und Capsaicin induzierte PKA-II Aktivität. Die Ergebnisse zeigen, dass sowohl AITC als auch Capsaicin die PKA-II cAMP-unabhängig aktivieren.

Item Type:	Thesis (PhD thesis)
Creators:	Creators Email ORCID ORCID Put Code Alm, Patricia Stefanie patricia.alm@netcologne.de https://orcid.org/0009-0001-0287-8090 UNSPECIFIED
URN:	urn:nbn:de:hbz:38-812091
Date:	2026
Language:	German
Faculty:	Faculty of Medicine
Divisions:	Faculty of Medicine > Anästhesiologie und Operative Intensivmedizin > Klinik für Anästhesiologie und Operative Intensivmedizin
Subjects:	Life sciences Medical sciences Medicine
Uncontrolled Keywords:	Keywords Language cAMP- unabhängige PKA-II Aktivierung, Schmerzforschung, TRPA1, TRPV1, PKA-II, Hyperalgesie, Nozizeption, pronozizeptiver Mechanismus, chronische Schmerzen, PKA-II Aktivität German
Date of oral exam:	8 June 2026
Referee:	Name Academic Title Hucho, Tim Universitätsprofessor Dr. rer. nat. Matthes, Jan Universitätsprofessor Dr. med.
Refereed:	Yes
URI:	http://kups.ub.uni-koeln.de/id/eprint/81209