Universität zu Köln

Zhu, Minyan (2003). A Genetic Screen for Genes Involved in the FGF Signalling Pathway in Drosophila melanogaster. PhD thesis, Universität zu Köln.

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Abstract

The FGF signal is important for cell survival, proliferation, differentiation and migration. It is not clear how the FGF signalling cascade is regulated. In order to identify genes downstream of FGF signalling, a gain-of-function (GOF) screen was conducted using the Drosophila compound eye as a model system. The screen was based on the observation that expression of an activated form of the FGF receptor and Dof together in the Drosophilia eye ('GMR>λ-fgfr, dof'), produces a rough eye phenotype, whereas expressing either alone has no effect. This implies that at least some of the components in the signalling cascade are present during Drosophila eye development. When one copy of raf, rhoA or rhoGEF was mutated, the rough eye phenotype of 'GMR>λ-fgfr, dof' flies was enhanced. In the screen, 'GMR>λ-fgfr, dof' flies were crossed to the EP collection and the progeny were screened for the modification of the rough eye phenotype. In total, 24 suppressors and 26 enhancers were obtained, which may affect 38 annotated genes. 8 lines did not have any interactions with other signalling pathways that I have tested, which are the PDGF and EGF signalling pathways, and pathways involving Cdc42 or Rac1. Nor were they found in any of the published GOF screens. In order to investigate the interaction of the candidates with the endogenous FGF signalling pathway, imprecise excisions of three candidates - EP719, EP3575 and EP863 - were generated and the mutant phenotypes were studied.

Item Type:	Thesis (PhD thesis)
Translated title:	Title Language Ein genetischer Screen nach in den FGF-Signalweg von Drosophila melanogaster involvierten Genen German
Translated abstract:	Abstract Language Der Fibroblasten-Wachstums-Faktor FGF-Signalweg ist wichtig für das Überleben der Zelle, die Proliferation, die Differenzierungn und die Zellwanderung. Die Regulation der FGF-Kaskade ist noch nicht vollständig aufgeklärt. Mit dem Ziel neue Gene zu identifizieren, die sich "downstream" des FGF-Rezeptors befinden, wurde ein "Misexpressions-Screen" durchgeführt, in dem das Facettenauge von Drosophila melanogaster als Modell System diente. Die Untersuchung basierte auf der Erkenntnis, dass die Expression einer ständig aktiven Form des FGF-Rezeptors zusammen mit dem Molekül "Downstream of FGF (DOF)" [`GMR>λ-fgfr, dof`] im Auge einen "Rauhen Augen" Phänotyp erzeugt. Die Expression eines der beiden Moleküle alleine hingegen erzeugt keinen Effekt. Dies deutet darauf hin, daß zumindest einige Komponenten der FGF-Signalkaskade während der Entwicklung des Auges von Drosophila melanogaster vorhanden sind. Die Mutation einer Kopie der Gene raf, rhoA oder rhoGEF führte zu einer Verstärkung des Augenphänotyps der `GMR>λ-fgfr, dof´-Fliegen. Im Screen wurden die `GMR>λ-fgfr, dof´-Fliegen mit den Stämmen der EP-Sammlung gekreuzt. Die Nachkommenschaft wurde auf Veränderungen des Augenphänotyps untersucht. Insgesamt wurden 24 Suppressoren und 26 Enhancer gefunden, welche 38 beschriebene Gene beeinflussen könnten. Acht dieser Kandidaten zeigen keinerlei Interaktion mit anderen untersuchten Signalwegen. Zu diesen gehören der PDGF-, der EGF und solche Signalwege in denen die Proteine Cdc42 oder Rac1 beteiligt sind. Sie wurden auch nicht in anderen, publizierten Misexpressions-Screens gefunden. Um die mögliche Interaktion von Kandidaten mit dem endogenen FGF-Signalweg zu untersuchen, wurden unpräzise Exisionen von drei Kandidaten -EP719, EP3575 und EP863- generiert und die mutanten Phänotypen studiert. German
Creators:	Creators Email ORCID ORCID Put Code Zhu, Minyan my.zhu@uni-koeln.de UNSPECIFIED UNSPECIFIED
URN:	urn:nbn:de:hbz:38-10145
Date:	2003
Language:	English
Faculty:	Faculty of Mathematics and Natural Sciences
Divisions:	Faculty of Mathematics and Natural Sciences > Department of Biology > Institute for Genetics
Subjects:	Life sciences
Uncontrolled Keywords:	Keywords Language Drosophila , FGF , Screen German Drosophila , FGF , Screen English
Date of oral exam:	3 July 2003
Referee:	Name Academic Title Leptin, Maria Prof. Dr.
Refereed:	Yes
URI:	http://kups.ub.uni-koeln.de/id/eprint/1014