Universität zu Köln

Pistone, Marta ORCID: 0000-0001-9060-7209 (2026). Tumour microenvironment immune features predict outcomes in Diffuse Large B-Cell Lymphoma. PhD thesis, Universität zu Köln.

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Abstract

Das diffus großzellige B-Zell-Lymphom (DLBCL) stellt den häufigsten Subtyp der Non-Hodgkin-Lymphome dar und zeichnet sich durch eine ausgeprägte biologische und klinische Heterogenität aus. Trotz bedeutender Fortschritte in der molekularen Charakterisierung zeigt ein erheblicher Anteil der Patientinnen und Patienten weiterhin ungünstige Verläufe, was die Notwendigkeit einer verbesserten prognostischen Stratifizierung und eines vertieften biologischen Verständnisses der Erkrankung unterstreicht. In der vorliegenden Arbeit analysierten wir eine Kohorte von 106 DLBCL-Patienten, aus deren formalinfixierten, paraffineingebetteten (FFPE) Tumourblöcken sowohl RNA als auch Gewebeschnitte gewonnen wurden. Aufbauend auf einem prognostischen Modell der Forschungsgruppe von Thomas Oellerich in Frankfurt, das DLBCL-Fälle in sieben prognostische Gruppen (PG1-PG7) klassifiziert, konzentrierten wir uns auf die Untersuchung der biologischen Unterschiede zwischen der Gruppe mit der ungünstigsten Prognose (PG4) und derjenigen mit der günstigsten Prognose (PG6). Zu diesem Zweck führten wir Bulk-RNA-Sequenzierung sowie multiplexe Immunfluoreszenzfärbungen (mIF) mit einem Panel von 20 Biomarkern durch, um eine integrierte molekulare und räumliche Charakterisierung der Tumourmikroumgebung (TME) zu ermöglichen. Die Transkriptomanalyse zeigte, dass immunbezogene Gene in PG4 im Vergleich zu PG6 signifikant herunterreguliert waren, was auf eine insgesamt unterdrückte Immunaktivität in der PG4-Untergruppe hindeutet. Die Pfadanalyse ergab eine verringerte Aktivierung immunologischer Signalwege, einschließlich der T-Zell-Rezeptor-Signalgebung, der Interferonantwort und der Antigenpräsentation. Die räumliche Analyse mittels mIF in Kombination mit maschinellem Lernen bestätigte, dass die TME von PG4-Fällen einen „immune-cold“-Phänotyp aufweist, charakterisiert durch eine reduzierte T-Zell-Infiltration, einen erhöhten Anteil M2-ähnlicher Makrophagen und eine verminderte Interaktion zwischen Tumour- und Immunzellen. Im Gegensatz dazu zeigten PG6-Proben einen „immune-hot“-Phänotyp mit einer ausgeprägten Präsenz zytotoxischer T-Zellen, einer aktiven Immun-Signalgebung und einer höheren Interaktionsrate zwischen Tumour- und Immunzellen. Zusammenfassend zeigen unsere Ergebnisse eine deutliche immunologische Dichotomie zwischen den prognostischen Gruppen PG4 und PG6 im DLBCL und verknüpfen transkriptionelle sowie räumliche Immunmerkmale mit dem klinischen Outcome. Die Befunde unterstützen das Konzept, dass ein immunsupprimiertes bzw. „immune-cold“-Mikromilieu zur schlechten Prognose der PG4-Patienten beiträgt, während eine „immune-hot“ und funktionell aktive TME den günstigen Verlauf in PG6 erklärt. Dieser integrierte molekulare und räumliche Ansatz liefert neue Einblicke in die Immunbiologie des DLBCL und hebt potenzielle Ansatzpunkte für immungerichtete therapeutische Strategien in Hochrisikogruppen hervor.

Item Type:	Thesis (PhD thesis)
Translated title:	Title Language Diffuse Large B-Cell Lymphoma UNSPECIFIED
Translated abstract:	Abstract Language Das diffus großzellige B-Zell-Lymphom (DLBCL) stellt den häufigsten Subtyp der Non-Hodgkin-Lymphome dar und zeichnet sich durch eine ausgeprägte biologische und klinische Heterogenität aus. Trotz bedeutender Fortschritte in der molekularen Charakterisierung zeigt ein erheblicher Anteil der Patientinnen und Patienten weiterhin ungünstige Verläufe, was die Notwendigkeit einer verbesserten prognostischen Stratifizierung und eines vertieften biologischen Verständnisses der Erkrankung unterstreicht. In der vorliegenden Arbeit analysierten wir eine Kohorte von 106 DLBCL-Patienten, aus deren formalinfixierten, paraffineingebetteten (FFPE) Tumourblöcken sowohl RNA als auch Gewebeschnitte gewonnen wurden. Aufbauend auf einem prognostischen Modell der Forschungsgruppe von Thomas Oellerich in Frankfurt, das DLBCL-Fälle in sieben prognostische Gruppen (PG1-PG7) klassifiziert, konzentrierten wir uns auf die Untersuchung der biologischen Unterschiede zwischen der Gruppe mit der ungünstigsten Prognose (PG4) und derjenigen mit der günstigsten Prognose (PG6). Zu diesem Zweck führten wir Bulk-RNA-Sequenzierung sowie multiplexe Immunfluoreszenzfärbungen (mIF) mit einem Panel von 20 Biomarkern durch, um eine integrierte molekulare und räumliche Charakterisierung der Tumourmikroumgebung (TME) zu ermöglichen. Die Transkriptomanalyse zeigte, dass immunbezogene Gene in PG4 im Vergleich zu PG6 signifikant herunterreguliert waren, was auf eine insgesamt unterdrückte Immunaktivität in der PG4-Untergruppe hindeutet. Die Pfadanalyse ergab eine verringerte Aktivierung immunologischer Signalwege, einschließlich der T-Zell-Rezeptor-Signalgebung, der Interferonantwort und der Antigenpräsentation. Die räumliche Analyse mittels mIF in Kombination mit maschinellem Lernen bestätigte, dass die TME von PG4-Fällen einen „immune-cold“-Phänotyp aufweist, charakterisiert durch eine reduzierte T-Zell-Infiltration, einen erhöhten Anteil M2-ähnlicher Makrophagen und eine verminderte Interaktion zwischen Tumour- und Immunzellen. Im Gegensatz dazu zeigten PG6-Proben einen „immune-hot“-Phänotyp mit einer ausgeprägten Präsenz zytotoxischer T-Zellen, einer aktiven Immun-Signalgebung und einer höheren Interaktionsrate zwischen Tumour- und Immunzellen. Zusammenfassend zeigen unsere Ergebnisse eine deutliche immunologische Dichotomie zwischen den prognostischen Gruppen PG4 und PG6 im DLBCL und verknüpfen transkriptionelle sowie räumliche Immunmerkmale mit dem klinischen Outcome. Die Befunde unterstützen das Konzept, dass ein immunsupprimiertes bzw. „immune-cold“-Mikromilieu zur schlechten Prognose der PG4-Patienten beiträgt, während eine „immune-hot“ und funktionell aktive TME den günstigen Verlauf in PG6 erklärt. Dieser integrierte molekulare und räumliche Ansatz liefert neue Einblicke in die Immunbiologie des DLBCL und hebt potenzielle Ansatzpunkte für immungerichtete therapeutische Strategien in Hochrisikogruppen hervor. German
Creators:	Creators Email ORCID ORCID Put Code Pistone, Marta pistonem2@gmail.com https://orcid.org/0000-0001-9060-7209 UNSPECIFIED
URN:	urn:nbn:de:hbz:38-815428
Date:	2026
Publisher:	Marta Pistone
Language:	English
Faculty:	Faculty of Medicine
Divisions:	Faculty of Medicine > Pathologie und Neuropathologie > Institut für Pathologie
Subjects:	Medical sciences Medicine
Uncontrolled Keywords:	Keywords Language Diffuse Large B-cell Lymphoma (DLBCL) English Tumour Microenvironment English Proteogenotypes English Multiplex Immunofluorescence English
Date of oral exam:	25 March 2026
Referee:	Name Academic Title Fischer, Matthias Prof. Dr. Tresch, Achim Prof. Dr.
Refereed:	Yes
URI:	http://kups.ub.uni-koeln.de/id/eprint/81542